顯微鏡的基本構造

 

　　光學顯微鏡由目鏡，物鏡，粗準焦螺旋，細準焦螺旋，壓片夾，通光孔，遮光器，轉換器，反光鏡，載物臺，鏡臂，鏡筒，鏡座，聚光器，光闌組成。

 

 

　　顯微鏡分類

 

　　光學顯微鏡

 

　　通常皆由光學部分、照明部分和機械部分組成。無疑光學部分是最為關鍵的，它由目鏡和物鏡組成。早于1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經造出類似顯微鏡的放大儀器。光學顯微鏡的種類很多，主要有明視野顯微鏡(普通光學顯微鏡)、暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡、偏光顯微鏡、微分干涉差顯微鏡、倒置顯微鏡。

 

　　電子顯微鏡

 

　　電子顯微鏡有與光學顯微鏡相似的基本結構特征，但它有著比光學顯微鏡高得多的對物體的放大及分辨本領，它將電子流作為一種新的光源，使物體成像。自1938年Ruska發明第一臺透射電子顯微鏡至今，除了透射電鏡本身的性能不斷的提高外，還發展了其他多種類型的電鏡。如掃描電鏡、分析電鏡、超高壓電鏡等。結合各種電鏡樣品制備技術，可對樣品進行多方面的結構 或結構與功能關系的深入研究。顯微鏡被用來觀察微小物體的圖像。常用于生物、醫藥及微小粒子的觀測。電子顯微鏡可把物體放大到200萬倍。臺式顯微鏡,主要是指傳統式的顯微鏡,是純光學放大，其放大倍率較高，成像質量較好，但一般體積較大,不便于移動,多應用于實驗室內,不便外出或現場檢測。

 

　　便攜式顯微鏡

 

　　便攜式顯微鏡,主要是近幾年發展出來的數碼顯微鏡與視頻顯微鏡系列的延伸。和傳統光學放大不同,手持式顯微鏡都是數碼放大,其一般追求便攜,小巧而精致,便于攜帶;且有的手持式顯微鏡有自己的屏幕,可脫離電腦主機獨立成像,操作方便,還可集成一些數碼功能,如支持拍照,錄像,或圖像對比,測量等功能。

 

　　數碼液晶顯微鏡，最早是由博宇公司研發生產的，該顯微鏡保留了光學顯微鏡的清晰，匯集了數碼顯微鏡的強大拓展、視頻顯微鏡的直觀顯示和便攜式顯微鏡的簡潔方便等優點。

 

　　掃描隧道顯微鏡

 

　　掃描隧道顯微鏡亦稱為“掃描穿隧式顯微鏡”、“隧道掃描顯微鏡”，是一種利用量子理論中的隧道效應探測物質表面結構的儀器。它于1981年由格爾德·賓寧(G.Binning)及海因里希·羅雷爾(H.Rohrer)在IBM位于瑞士蘇黎世的蘇黎世實驗室發明，兩位發明者因此與恩斯特·魯斯卡分享了1986年諾貝爾物理學獎。

 

　　它作為一種掃描探針顯微術工具，掃描隧道顯微鏡可以讓科學家觀察和定位單個原子，它具有比它的同類原子力顯微鏡更加高的分辨率。此外，掃描隧道顯微鏡在低溫下(4K)可以利用探針尖端精確操縱原子，因此它在納米科技既是重要的測量工具又是加工工具。

 

　　STM使人類第一次能夠實時地觀察單個原子在物質表面的排列狀態和與表面電子行為有關的物化性質，在表面科學、材料科學、生命科學等領域的研究中有著重大的意義和廣泛的應用前景，被國際科學界公認為20世紀80年代世界十大科技成就之一。

 

　　顯微鏡的使用方法

 

　　顯微鏡的使用

 

　　利用自然光源鏡檢時，最好用朝北的光源，不宜采用直射陽光;利用人工光源時，宜用日光燈的光源。

 

　　鏡檢時身體要正對實習臺，采取端正的姿態，兩眼自然張開，左眼觀察標本，右眼觀察記錄及繪圖，同時左手調節焦距，使物象清晰并移動標本視野。右手記錄、繪圖。

 

　　鏡檢時載物臺不可傾斜，因為當在五套載物臺傾斜時，液體或油易流出，既損壞了標本，又污染載物臺，也影響檢查結果。

 

　　鏡檢時應將標本按一定方向移動視野，直至整個標本觀察完畢，以便不漏檢，不重復。

 

　　顯微鏡的重光為對光，接物鏡的轉換及光線的調節。觀察寄生蟲標本時，光線調節甚為重要。因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等，均為自然光狀態的物體，有大有小，色澤有深有淺，有的無色透明，而低倍、高倍接物鏡轉換較多，故須隨著鏡檢時對不同標本和要求，需要隨時調節焦距和光線，這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下，染色標本光線宜強，無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強。

 

　　1. 對光：(1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線。

 

　　(2)撥動反光鏡，調節至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面，光源強時用平面，較暗時用凹面，需要強光時，將聚光器提高，光圈放大;需要弱光時，將聚光器降低，或光圈適當縮小。

 

　　(3)將待觀察的標本置載物臺上，轉動粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉動粗調節器的同時，須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離。

 

　　(4)左眼于接目鏡觀察，同時左手轉動粗調節，使鏡筒徐徐上升以調節焦距，使視野內的物象看到上時即停，再調微調節器，至標本清晰為止。

 

　　2. 接物鏡的使用及光線的調節：

 

　　顯微鏡一般具有三個接物鏡，即低倍、高倍及油鏡，固定于接物鏡轉換盤孔中。觀察標本時，先使用低倍接物鏡，此時，視野較大，標本較易查出，但放大倍數較小(一般放大100倍)，較小的物體不易觀察其結構。高倍接物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍)，能觀察微小的物體或結構。

 

　　寄生蟲的蠕蟲卵，微絲蚴，原蟲的滋養體及包囊，昆蟲的幼蟲，均使用低、高倍鏡。組織細胞內的原蟲，則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察，如在低倍鏡下不能準確鑒定所見的物體或其內部構造時，則轉高倍鏡觀察。使用油鏡觀察，一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察。

 

　　3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別：

 

　　(1)標明放大倍數10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。

 

　　(2)低倍鏡最短，高倍鏡較長，油鏡最長。

 

　　(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大，高倍鏡較大，油鏡最小。

 

　　(4)油鏡頭上常刻有黑色環圈，或“油”字。

 

　　4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法：

 

　　(1)光線對好后，移動推進器尋找需要觀察的標本。

 

　　(2)如標本的體積較大，不能清楚查見其構造因而不能確認時，則將標本移至視野中央，再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方。

 

　　(3)旋轉微調節器至物象清晰為止。

 

　　(4)調節聚光器及光圈，使視野內的物象達到最清晰的程度。

 

　　5. 油鏡的使用方法：

 

　　(1)原理：使用油鏡觀察時，需加香柏油，因為油鏡需要進入鏡頭的光線多，但油鏡的透氣孔最小，這樣進入的光線就少，物體不易看清楚。同時又因自玻片透過的光線，由于介質(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片：n=1.52，空氣：n=1.0)不同而發生了折射散光，因此射入鏡頭的光線就更少，物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質如香柏油，加于標本與玻片之間，使光線不通過空氣，這樣射入鏡頭的光線就較多，物象就看得清楚。

 

　　(2)油鏡的使用：

 

　　a.將光線調至最強程度(聚光器提高，光圈全部開放)。

 

　　b.轉動粗調節器使鏡筒上升，滴香柏油1小滴(不要過多，不要涂開)于接物鏡正下方標本上。

 

　　c.轉動接物鏡轉換盤，使油鏡頭于鏡筒下方。

 

　　d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀察下，轉動粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內，輕輕接觸玻片為止。

 

　　e.慢慢轉動粗調節器，使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。

 

　　f.轉動微調節器，使視野物象達到最清晰的程度。

 

　　g.左手徐徐移動推進器，并轉動微調節器以觀察標本。

 

　　h.標本觀察完畢后，轉動粗調節器將鏡筒升起，取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。

 

　　6. 注意事項：

 

　　(1)使用顯微鏡之前，應熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法，特別應掌握識別三種接物鏡之特征。

 

　　(2)寄生蟲學實習中所觀察的標本，大多數為無色和顏色較淺，因此必須注意光線的調節。

 

　　(3)新鮮標本觀察時，須加蓋玻片，以免標本因蒸發而干燥變形或污染侵蝕接物鏡，同時可使標本表面勻平，光線得以集中，有利于觀察。