基因工程中有著非常關(guān)鍵的的一個步驟，就是把外源DNA插入載體分子以構(gòu)建重組DNA。可見選擇一種運載基因的載體作媒介物是必要的，因為每種生物都具有很強的排他性，外源DNA單獨進人受體細(xì)胞時必將被破壞，這就好比過河時必須用到船一樣。但是在培育轉(zhuǎn)基因動物或植物時，很多科學(xué)家卻把目光轉(zhuǎn)向了把目的基因直接導(dǎo)入核基因組的方法。為什么目的基因可直接導(dǎo)入呢，中國學(xué)者周光宇提出的“DNA片段雜交假說”對此作出了很好的解釋。該假說認(rèn)為：外源DNA進入受體細(xì)胞后，經(jīng)酶切和分解后形成的局部DNA分子，其在核苷酸序列上可能與受體DNA具有一定的親和性，并能粘附在母本DNA上，在復(fù)制時整合進去實現(xiàn)DNA的片段雜交。目前這一假說已被證實，并出現(xiàn)一些將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞的分子育種新方法，下面重點介紹比較常見的的三種方法。

　　1，基因槍法

　　基因槍法又稱生物彈法或微粒槍法、微粒轟擊法，是依賴高速度的金屬顆粒將外源基因引入活體細(xì)胞的一種轉(zhuǎn)化技術(shù)。基因槍根據(jù)其加速裝置可分為火藥式、電動式和氣動式。其中火藥式基因槍的結(jié)構(gòu)和一般軍事上的槍十分相似，它主要由滑膛槍、真空轟擊室和阻彈部件構(gòu)成的，其操作的基本原理如下：火藥爆炸產(chǎn)生的驅(qū)動力會推動塑料彈丸高速運動，當(dāng)彈丸運動至彈膛里的金屬板時，塑料彈丸的進入會被阻止，但塑料彈丸前端攜帶有目的基因的微彈卻可以依靠慣性高速通過微孔，并擊中緊貼金屬板的靶細(xì)胞。因為微彈的體積非常細(xì)小，再加上射擊的速度非常快，所以受到轟擊的細(xì)胞仍能保持正常的生物活性。而微彈上的外源DNA也隨之順利導(dǎo)入靶細(xì)胞，并整合到核染色體上得到表達，實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)化。基因槍法是目前國際上最先進的基因?qū)�入技術(shù)，它以操作簡單迅速、基因用量少、對靶細(xì)胞要求低等優(yōu)點而備受科學(xué)工作者的青睞。

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