純化大腸桿菌

(1)原理

在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個細(xì)胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細(xì)菌菌落。

(2)微生物接種方法

平板劃線法：

平板劃線法中細(xì)胞的分離和稀釋過程發(fā)生在接種環(huán)在固體平板表面上的劃線和移動過程中。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成純種的單個菌落(如圖，教材用的是第二種方法)。

劃線操作時注意：

用接種環(huán)取菌種之前、每次劃線之前和劃線結(jié)束都要進行灼燒滅菌，灼燒后要在酒精燈附近冷卻后再操作。

第一次灼燒操作是殺死接種環(huán)上原有的微生物，每次劃線之前灼燒是殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。劃線結(jié)束后灼燒是為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

劃線時不要劃破培養(yǎng)基，如果采用分段劃線法操作從第二次操作應(yīng)總在上一次劃線末端開始，首尾不能相連;操作始終在酒精燈火焰旁進行。

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